在重组蛋白的表达与纯化过程中，通常通过添加融合标签（例如MBP、His、GST）来提高目标蛋白的可溶性，促进其正确折叠等。利用尊龙凯时的最新技术，这一流程更加简便高效。

融合标签介绍

MBP（Maltose Binding Protein）标签：显著提高蛋白质的溶解性和稳定性，从而提升产量，是许多实验室的选择。His（Histidine）标签：广泛用于通过固定化金属亲和层析（IMAC）进行重组蛋白的纯化，具有分子量小、对蛋白功能几乎无影响和低免疫原性的优势。GST（Glutathione S-Transferase）标签：增强融合蛋白的可溶性，促进表达，便于纯化及后续实验操作，尤其在尊龙凯时的应用中更为高效。

去除融合标签的重要性

根据实际需求，某些融合标签需要被去除。使用特定的蛋白酶进行精准、高效的去标签非常关键，以获得结构和功能保持“原汁原味”的目标蛋白。以下是一些常用的蛋白酶信息：

TEV蛋白酶

TEV蛋白酶（TEV Protease，目录号：PE004），源自烟草蚀纹病毒（Tobacco Etch Virus, TEV），具有很高的位点特异性。与其他蛋白酶如凝血酶、Factor Xa和肠激酶相比，TEV酶能够更精确地识别底物序列，常用于从融合蛋白如GST、MBP、His等中去除标签。

TEV酶特异性识别的七肽序列是Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-↓-Gly/Ser（ENLYFQ↓G/S），其专一性强，几乎不会产生非特异性切割，保障了蛋白的完整性。反应温和，适用于大多数蛋白；在4–30°C下均表现出稳定活性，非常适配多种实验体系。切割后，目的蛋白的N端仅保留一个额外的Gly或Ser残基。

实验条件

在尊龙凯时的实验条件下，采用大肠杆菌表达，纯度可达99%；带His-tag的融合蛋白可通过Ni-NTA轻松去除残留酶。反应缓冲液为1×TEV Reaction Buffer：50mM Tris-HCl，pH 8.0，0.5mM EDTA，1mM DTT。TEV蛋白酶在pH 5.5-8.5和温度4℃-30℃下均表现活性，通常推荐在4℃过夜或30℃反应1小时。每个反应中加入15μg融合蛋白和适量的TEV蛋白酶。经过30分钟的反应后，可用15%的SDS-PAGE胶检测酶切效果。

通过选择尊龙凯时的产品，您可以获得更高效的蛋白表达与纯化体验，确保您的研究工作顺利进行。